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2019-1119
一、細胞株細胞株(CellStrain):也就是說,細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后即為細胞系(cellline),由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限,可稱為有限細胞系(finitecellline),如可以連續(xù)培養(yǎng),則稱為連續(xù)細胞系(continuouscellline),培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。所以細胞株是通過選擇法或克...
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2019-1118
2019-1112
一、實驗原理細胞培養(yǎng)可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。直接從體內(nèi)獲取的組織細胞進行培養(yǎng)為原代培養(yǎng);當原代培養(yǎng)的細胞增殖達到一定密度后,則需要做再培養(yǎng),即將培養(yǎng)的細胞分散后,從一個容器以1:2或其他比率轉(zhuǎn)移到另一個或幾個容器中擴大培養(yǎng),為傳代培養(yǎng),傳代培養(yǎng)的累積次數(shù)就是細胞的代數(shù)。細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或DMSO作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少細胞內(nèi)冰晶的...
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2019-1111
小鼠子宮頸癌細胞胞培養(yǎng)步驟培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備1)準備DMEM培養(yǎng)基(DMEM,GIBCO,貨號11965-092),90%;胎牛血清,10%2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37C,培并箱濕度為709%-80%。凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存有1mlL細抱縣液的凍存管迅速放入37C水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖売解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,...
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2019-119
按以下操作可避免血清沉淀的產(chǎn)生:1、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。2、血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。3、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。4、勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。5、勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。6、若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃...
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