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技術(shù)文章
2019-517
懸浮細(xì)胞的傳代懸浮細(xì)胞傳代比貼壁細(xì)胞傳代稍微簡單一些。由于細(xì)胞已經(jīng)在生長培養(yǎng)基中的懸浮，因此無需通過酶的作用使其從培養(yǎng)容器表面脫離，整個過程較為迅速，對細(xì)胞的損傷也較小。懸浮培養(yǎng)時不進(jìn)行生長培養(yǎng)基的更換；而是每2到3天加料一次，直到細(xì)胞匯合?？梢灾苯釉谂囵B(yǎng)瓶中稀釋細(xì)胞，然后繼續(xù)培養(yǎng)擴增，或者也可以從培養(yǎng)瓶中取出一部分細(xì)胞，將余下的細(xì)胞稀釋到該細(xì)胞系適宜的接種密度。懸浮細(xì)胞的傳代后的延滯期一般比貼壁細(xì)胞要短。懸浮細(xì)胞培養(yǎng)容器懸浮培養(yǎng)可采用未經(jīng)組織培養(yǎng)處理的無菌培養(yǎng)瓶（例如：不嗲...
查看更多2019-517
以下實驗方案介紹了貼壁培養(yǎng)哺乳動物細(xì)胞傳代的一般流程。請注意昆蟲細(xì)胞與哺乳動物細(xì)胞傳代的一些關(guān)鍵步驟有所不同。更多信息請參閱下一頁的“昆蟲細(xì)胞傳代的注意事項”部分。為自己所用的細(xì)胞系傳代時，建議您嚴(yán)格遵守實驗中所有產(chǎn)品附帶的操作說明。偏離某種細(xì)胞所需的培養(yǎng)條件會導(dǎo)致細(xì)胞表型異常，甚至培養(yǎng)*失敗。所需材料：裝有貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)容器：經(jīng)過組織培養(yǎng)處理的培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿：*生長培養(yǎng)基，預(yù)熱至37℃：一次性無菌15-ml試管：37℃培養(yǎng)箱，充有二氧化碳濃度為5％的濕化空氣：平衡鹽...
查看更多2019-58
GIBCO10099-141胎牛血清常儲存在-20℃，避光（因為光線可造成維生素的損失），避免反復(fù)凍融，尤其不要放在有自動除霜功能的冰箱中。如果一次用不完，應(yīng)分裝在15ml或50ml大離心管或其他小瓶中，一次使用一管，較為方便。GIBCO10099-141胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量較大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份，常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)...
查看更多2019-423
進(jìn)口胎牛血清需要熱滅活嗎？何謂熱滅活？一般是以56C，30分鐘來處理已解凍的血清，因為此加熱步驟，可以使補體去活化，而補體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增強吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。我需要滅活血清嗎？–實驗顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形...
查看更多2019-423
澳洲進(jìn)口胎牛血清里有大片沉淀，這個正常嗎??說明1:血清非人工產(chǎn)品，有些東西沉淀出來系自然現(xiàn)象–纖維蛋白原–鹽析出。如磷酸鈣等–膽固醇和脂肪酸–蛋白析出?說明2:沉淀在下列情況下還會增加:–熱滅活–37℃培養(yǎng)(常常由此引發(fā)歧異)–反復(fù)凍融–熔化中沒有搖勻–gamma照射–長期存放在2-8°C?另外我們還發(fā)現(xiàn)：－血清加入到RPMI1640中時，沉淀往往會發(fā)生或增加–pH升高時，沉淀會增加–在培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中，因為培養(yǎng)基的蒸發(fā)也會導(dǎo)致沉淀的增加?說明3:沉淀不會影響其對細(xì)胞的促生...
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