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技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2019-823
1、胎牛血清的選擇市場上的胎牛血清種類繁多，魚龍混雜，很多科研工作者，特別是剛接觸細胞培養(yǎng)的人，難以分辨血清質(zhì)量的優(yōu)劣。根據(jù)鄙人十多年來血清生產(chǎn)銷售的經(jīng)驗來看一、外觀拿到血清，zui先接觸的是血清外觀，對于缺少細胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人來說，外觀的判斷尤為重要1、顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，我國的細胞培養(yǎng)用血清標準是不高于20mg/dl，實際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響，這個指標的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴謹規(guī)范程度，良好的操作能降低血清的溶血...
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在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞不貼壁、生長緩慢、生長不好，甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞不貼壁可能原因：●胰蛋白酶消化過度●支原體污染●培養(yǎng)基pH值過堿（NaHCO3分解）●細胞老化●接種細胞起始濃度太低或太高解決方法：●縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度●分離培養(yǎng)物，檢測支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物。●使用無菌醋酸溶液調(diào)整pH值或充入無菌CO2●啟用新的保種...
查看更多2019-819
4．特異性紅細胞形態(tài)改變：（1）刺（棘）狀細胞或鋸形細胞（AcaNtbocyte，BurrCells）：在血細胞表面呈不規(guī)則的、較多的刺狀突出，呈鋸齒狀或刺狀。加EDTA-Na2更顯著。此細胞由膜質(zhì)改變所致；見于吸收不良反應、肝病、脾切除后、PK缺乏性貧血、先天性缺乏β-脂蛋白血癥。（2）刺毛細胞（Echinocyte）：整個細胞表面有棘突狀突起，從皺縐圓盤形發(fā)展或皺縮球形，直至棘突消失，見于尿毒癥、PK缺乏癥、輸注低鉀庫血、胃癌、胃潰瘍出血等.（3）裂細胞（Schlzocy...
查看更多2019-819
1．RBC的Hb、網(wǎng)織RBC、MCV、MCH、MCHC及RBC體積分布寬度（RDW）是判定貧血類型重要依據(jù)：(1)Hb/RBC比值：正常人：Hb/RBC比值為3gHb/L=100萬RBC/μL即3:1。AA、溶血性貧血及繼發(fā)性貧血等屬此類。3:1者即為大細胞高色素性貧血,(2)網(wǎng)織RBC是新生的RBC，可反映造血機能的好壞。正常情況下為0.5~1.0%,代償性反應者多5%。其網(wǎng)織RBC內(nèi)嗜堿性網(wǎng)織增多，代償性功能減低者，低于正常水平。多見于AA，但有不典型AA（1/4）患者可...
查看更多2019-815
三、無血清培養(yǎng)基1979年神經(jīng)細胞培養(yǎng)出現(xiàn)了一個重要進展，用化學添加劑即可維持神經(jīng)細胞存活與生長而不需要在培養(yǎng)基中添加血清。其工作基礎是用合適的激素、營養(yǎng)物和促貼壁的物質(zhì)的組合置換培養(yǎng)基中的成分，后找到了適合大多數(shù)細胞培養(yǎng)的試劑配方，該配方稱為N2，專門用于神經(jīng)細胞培養(yǎng)，早是用在B104大鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系的培養(yǎng)。它的基礎培養(yǎng)基是1：1的DMEM與H12的混合液，添加了胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、腐胺和硒。胰島素和胰島素樣生長因子對于大多數(shù)類型細胞的存活和生長有重要作用，硒是谷胱甘肽...
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