技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2020-519
人源細(xì)胞系作為體外模型而被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究。正確數(shù)據(jù)的獲得常依賴于細(xì)胞系的特性,尤其是當(dāng)它用來(lái)替代其來(lái)源者的組織時(shí)。人源細(xì)胞系常規(guī)培養(yǎng)傳代流程:(1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在1-2min)(2)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存(3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中...
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2020-59
特級(jí)胎牛血清清需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月.由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽?。血清在?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中起著多方面的作用可以概括為:①提供細(xì)胞生存和增殖所必需的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)因子。②補(bǔ)充基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量不足的營(yíng)養(yǎng)成分。③含有一些可供貼壁細(xì)胞型細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的基質(zhì)成分。④提供載體蛋白,可結(jié)合維生素、脂質(zhì)、金屬離子等。⑤在一些情況下,中和毒性物質(zhì)保護(hù)細(xì)胞...
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2020-56
能夠調(diào)節(jié)多種細(xì)胞的生理功能的細(xì)胞因子是由細(xì)胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物質(zhì)。細(xì)胞因子及其受體的濃度可反映疾病病理變化過(guò)程,通過(guò)細(xì)胞因子檢測(cè)以及可溶性受體的水平的檢測(cè),可以評(píng)價(jià)不同藥物治療疾病的效果。細(xì)胞因子是由活化的淋巴細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞及一些基質(zhì)、內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞產(chǎn)生的一類(lèi)非抗體、非補(bǔ)體的可溶性物質(zhì)。干擾素(IFN)是宿主細(xì)胞受病毒感染后產(chǎn)生的一種非特異性防御因子,具有抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、控制細(xì)胞增殖的作用。進(jìn)行細(xì)胞因子檢測(cè)可以判斷機(jī)體免疫功能,對(duì)于疾病的診斷...
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2020-429
1.如何選用培養(yǎng)基?培養(yǎng)某一類(lèi)型細(xì)胞沒(méi)有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)??傊琈EM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng),各種目的無(wú)血清培養(yǎng)的是AIMV培養(yǎng)基(SFM)。2.為什么要熱滅活血清?加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在進(jìn)行免疫學(xué)研究、培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。3.L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?...
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2020-424
細(xì)胞培養(yǎng)中的各種問(wèn)題解答在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中,或許你會(huì)有一系列的問(wèn)題想要問(wèn)。今天為大家整理了一些關(guān)于細(xì)胞的常見(jiàn)問(wèn)題解答。一、細(xì)胞成長(zhǎng)曲線測(cè)守時(shí)為什么要做重復(fù)孔?答:測(cè)定細(xì)胞成長(zhǎng)曲線細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)挑選3個(gè)復(fù)孔,每孔分別計(jì)三次,取其平均值,目的是減小操作差錯(cuò)。二、為什么制作的細(xì)胞成長(zhǎng)曲線沒(méi)有到達(dá)平臺(tái)期?答:可能有以下原因:一是細(xì)胞接種密度過(guò)低;二是細(xì)胞培育時(shí)刻過(guò)短;三是細(xì)胞成長(zhǎng)狀況欠好,使其不能正常增殖。三、怎么挑選細(xì)胞接種數(shù)?答:可根據(jù)細(xì)胞傳代培育過(guò)程中接種數(shù)及細(xì)胞成長(zhǎng)周期進(jìn)行核算,...
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